在线日韩成人电视播放网站视频免费,9797成人网站在线观看,最新日韩成人综合网在线观看视频,国产成人亚洲精品毛片 - www.rankpay-promocode.com

?

組織勻漿定義：將分化的細(xì)胞群用物理機(jī)械手段或其它方法，使細(xì)胞破碎旧困，細(xì)胞內(nèi)容物釋放拌喳，與細(xì)胞碎片形成的固液混合形式的濃稠液體累驮。

一扮人、取適量組織塊拓劝，用預(yù)冷PBS（0.01mol/L, pH 7.0-7.4）沖洗息体，去除表面殘留的血液與雜質(zhì)峭跺。（很多用戶疑惑墓老，這個適量坚矢，到底是多少？ELISA試劑盒檢測中：血清或細(xì)胞上清樣本用量100μL/指標(biāo)（單孔）辽蚀；組織用量15mg/指標(biāo)（單孔）翁纵，差不多干枯綠豆大小。?）具體老鼠各器官大小可見下圖泳落。

二沐恨、將組織塊稱重，再剪切成盡可能的小碎塊婚被，以便充分勻漿狡忙；

三梳虽、可同時選用多種勻漿方法達(dá)到較好的破碎效果：首先將組織塊移入玻璃勻漿器，加入 5-10ml預(yù)冷PBS(組織與 PBS 的質(zhì)量體積比建議為 1:9灾茁，即1g 樣本加入 9ml PBS)進(jìn)行充分研磨（有條件實驗室可選用機(jī)器勻漿）窜觉，該過程需在冰上進(jìn)行；得到的勻漿液可再利用超聲破碎或反復(fù)凍融進(jìn)一步處理（超聲破碎過程中注意冰浴降溫北专；反復(fù)凍融法可重復(fù) 2 次）禀挫。

玻璃勻漿器

超聲波細(xì)胞破碎儀

?

超聲波細(xì)胞破碎儀能用于多種動植物、病毒拓颓、細(xì)胞语婴、細(xì)菌及組織的破碎，同時可用來乳化驶睦、分立砰左、勻化、提取啥繁、消泡菜职、清晰、納米材料的植被头熏、分散及加速化學(xué)反應(yīng)等睬漩，在醫(yī)學(xué)、軍事转挽、工業(yè)漫诬、農(nóng)業(yè)上有很多的應(yīng)用。

1届审、在破碎的過程中會大量的產(chǎn)熱胀垃，一般的都是冰浴下破碎；

2噪旭、切記空載据滑，一定要將超聲變幅桿插入樣品后才能開機(jī)；

3垢蔑、變幅桿（超聲探頭）入水深度：15mm左右培晓，液面高度最好有25mm以上，探頭要居中菩擦，探頭不能碰到容器壁和底廓握。超聲波是垂直縱波，插入太深不容易形成對流嘁酿，影響破碎效率隙券；

1）時間：超聲時間每次最好不要超過5秒，間隙時間應(yīng)大于或等于超聲時間娱仔，以便于熱量散發(fā)沐飘。時間設(shè)定應(yīng)以超聲時間短，超聲次數(shù)多原則拟枚，可延長超聲機(jī)子以及探頭的壽命薪铜；

2）超聲功率：不宜太大，以免樣品飛濺或起泡沫恩溅。如小于10ml樣品容量隔箍，功率應(yīng)在200w以內(nèi)；10-200ml樣品容量的功率在200－400w脚乡；200ml以上的樣品容量功率在300-600w之間蜒滩；

3）容器選擇：有多少的樣品就選多大的燒杯，這樣也是有利樣品在超聲中對流奶稠，提高破碎效率绍掂。例如；20ML的處理量最好用25ML的燒杯钟唯；

如10ml細(xì)胞勻漿樣品設(shè)置參數(shù):100W识俄，60次，超聲3秒焚痰，間隙5秒 (總時間為8分鐘)纫蝗。

5、若樣品放在1.5ml的EP管里請一定要將EP管固定好盯萄，以防冰浴融化后液面下降導(dǎo)致空載仇韩；

6、日常保養(yǎng)：用完后用酒精擦洗探頭或用清水進(jìn)行超聲用牲；

7塌纯、使用超聲波細(xì)胞破碎儀微探頭時，振幅調(diào)節(jié)不得超過70%勋酿，否則會造成探頭損壞隆肪。

四、將制備好的勻漿液于5000×g 離心 5分鐘博个，留取上清即可檢測肘习。

五、如果樣本需要長期保存坡倔，請?zhí)砑拥鞍酌敢种苿８鶕?jù)實驗需要脖含，組織勻漿樣本可先定量總蛋白罪塔，以便于統(tǒng)計分析數(shù)據(jù)。某些組織樣本腎臟，腦組織會有假陽性反應(yīng)征堪。處理樣本的過程就是收集目標(biāo)蛋白的過程瘩缆，由于蛋白容易變性，降解佃蚜，故該過程應(yīng)盡量溫和庸娱。樣本處理之后的儲存也非常重要，尤其注意不要反復(fù)凍融谐算，樣本處理之后可分裝密封保存熟尉， 4℃保存應(yīng)小于 1 周，-20 ℃不應(yīng)超過 1 個月佳抗，-80℃不應(yīng)超過3個月坠街。在標(biāo)本使用前應(yīng)緩慢均衡至室溫，不應(yīng)加熱使之融解灵科。

?